Сукач О. М., Коваленко І. Ф., Всеволодська С. О., Коваленко С. Є., Оченашко О. В.

ВИКОРИСТАННЯ АУТОФЛУОРЕСЦЕНЦІЇ ДЛЯ ВІЗУАЛІЗАЦІЇ ЖИТТЄЗДАТНИХ НЕЙРАЛЬНИХ КЛІТИН У СКЛАДІ ТРИВИМІРНИХ СТРУКТУР

---

Показати/Завантажити PDF

Про автора:

Сукач О. М., Коваленко І. Ф., Всеволодська С. О., Коваленко С. Є., Оченашко О. В.

Рубрика:

БІОЛОГІЯ

Тип статті:

Наукова стаття

Анотація:

Пошук простих, неінвазивних та нетоксичних методів візуалізації нейральних клітин у складі тривимірних структур є актуальною проблемою клітинної біології і біотехнології. В якості такого методу може бути використана прижиттєва ауто флуоресценція, яка може надати інформацію про життєздатність, морфологічний і фізіологічний стан нейральних клітин у складі тривимірних структур. Мета – дослідити можливість використання ауто флуоресценції NAD(P)H і флавінів для візуалізації і оцінки життєздатності нейральних клітин у складі агрегатів і сфероїдів. В експериментах на тривимірних агрегатах і сфероїдах нейральних клітин, отриманих з тканини головного мозку новонароджених щурів, вивчали ауто флуоресценцію клітин в залежності від їх життєздатності. Було встановлено, що використання лазера з хвилею 405 нм призводить до збудження ауто флуоресценції нейральних клітин в зеленій області спектру, що дозволяє проводити неінвазивну, прижиттєву візуалізацію живих клітин у складі тривимірних структур, оцінювати їх кількість і щільність пакування. Аналіз інтенсивності зеленої ауто флуоресценції нейральних клітин тривимірних структур відкриває можливості для проведення моніторингу їх метаболічного стану в режимі реального часу.

Теги:

Список цитованої літератури:

1. Han SJ, Kwon S, Kim KS. Challenges of applying multicellular tumor spheroids in preclinical phase. Cancer Cell Int. 2021;21:152. DOI: https://doi.org/10.1186/s12935-021-01853-8.
2. Mueller-Klieser W. Three-dimensional cell cultures: from molecular mechanisms to clinical applications. Am. J. Physiol. 1997;273:C1109-C1123. DOI: https://doi.org/10.1152/ajpcell.1997.273.4.C1109.
3. Boutin ME, Voss TC, Titus SA, Cruz-Gutierrez K, Michael S, Ferrer M. A high-throughput imaging and nuclear segmentation analysis protocol for cleared 3D culture models. Scientific reports. 2018;8(1):11135. DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-018-29169-0.
4. Frappart PO, Walter K, Gout J, Beutel AK, Morawe M, Arnold F, et al. Pancreatic cancer-derived organoids–a disease modeling tool to predict drug response. United European Gastroenterology Journal. 2020;8(5):594-606. DOI: https://doi.org/10.1177/2050640620905183.
5. Hofer M, Lutolf MP. Engineering organoids. Nat Rev Mater. 2021;6:402-420. DOI: https://doi.org/10.1038/s41578-021-00279-y.
6. Mueller-Klieser W. Multicellular spheroids. J Cancer Res Clin Oncol. 1987;113:101-122. DOI: https://doi.org/10.1007/BF00391431.
7. Gunti S, Hoke ATK, Vu KP, London NR. Organoid and spheroid tumor models: techniques and applications. cancers. 2021;13:874. DOI: https://doi.org/10.3390/cancers13040874.
8. Aubin JE. Autofluorescence of viable cultured mammalian cells. J Histochem Cytochem. 1979;27(1):36-43. DOI: https://doi.org/10.1177/27.1.220325.
9. Petrenko AYu, Sukach AN. Isolation of intact mitochondria and hepatocytes using vibration. Analytical Biochem. 1991;194(2):326-329. DOI: https://doi.org/10.1016/0003-2697(91)90236-m.
10. Sukach AN, Liashenko TD, Shevchenko MV. Properties of isolated neural cells from newborn rat in tissue in vitro. Biotechnologia Acta. 2013;6(3):63-68. Available from: http://nbuv.gov.ua/UJRN/biot_2013_6_3_8.
11. Jones KH, Senft JA. An improved method to determine cell viability by simultaneous staining with fluorescein diacetate-propidium iodide. J Histochem Cytochem. 1985;33(1):77-79. DOI: https://doi.org/10.1177/33.1.2578146.
12. Croce A, Bottiroli G. Autofluorescence spectroscopy and imaging: a tool for biomedical research and diagnosis. European Journal of Histochemistry. 2014;58(4):2461. DOI: https://doi.org/10.4081/ejh.2014.2461.
13. Aubin JE. Autofluorescence of viable cultured mammalian cells. J Histochem Cytochem. 1979;27(1):36-43. DOI: https://doi.org/10.1177/27.1.220325.

Публікація статті:

«Вісник проблем біології і медицини», 2024 Випуск 2, 173, 154-164 сторінки, код УДК 535.37:611.018.82.085.2:576.7

DOI:

10.29254/2077-4214-2024-2-173-154-164