Чернобай Н. А., Булавіна В. С., Руднєва К. Є.
УДОСКОНАЛЕННЯ МЕТОДІВ ЗБЕРЕЖЕННЯ ДНК ДЛЯ ЗАСТОСУВАННЯ В СУДОВІЙ ЕКСПЕРТИЗІ І НАУКОВІЙ ПРАКТИЦІ
Показати/Завантажити PDF
Про автора:
Чернобай Н. А., Булавіна В. С., Руднєва К. Є.
Рубрика:
МЕТОДИ ТА МЕТОДИКИ
Тип статті:
Наукова стаття
Анотація:
Дослідження присвячено вивченню способів отримання та довготривалого зберігання ДНК зразків з метою використання їх у різних сферах, зокрема криміналістиці, медицині тощо. У судовій експертизі збереження ДНК є необхідним для ідентифікації осіб та підтвердження кримінальних розслідувань, що дозволяє повторно аналізувати докази за допомогою сучасних технологій, забезпечуючи справедливість у судових рішеннях. У медицині збереження ДНК допомагає вивчати генетичні захворювання та схильності, що сприяє своєчасній ідентифікації, ранній профілактиці та розробці ефективних методів лікування. Крім того, збереження ДНК відіграє важливу роль у дослідженнях еволюції, надаючи інформацію про біорізноманіття та генетичні зв’язки між видами. Метою цього дослідження було розробити оптимальний метод отримання та зберігання зразків ДНК з високою концентрацією протягом часу. Об’єкт і методи дослідження. Змиви ДНК з залишків відбитків пальців людини були зібрані за допомогою деіонізованої води або модифікованого буфера (10 мМ Тріс (гідроксиметил) амінометан, 0,5% об. Твін 20, 50 мМ KCl, 0,1 мМ ЕДТА (етилендіамін-Ν,Ν,Ν’,Ν’-тетраацетат), 5% гліцерин, 0,1% NaN3 (азид натрію), стерильна деіонізована вода). Зберігання проводилось протягом 0-30 діб при температурах 4°C, 20°C, -20°C та -196°C. Результати. Дослідження зосереджено на вдосконаленні методів зберігання ДНК, зокрема для біологічних слідів з низькою концентрацією, таких як залишки відбитків пальців людини. Результати показали, що зразки, збережені при кімнатній температурі, зазнають різкого зниження концентрації ДНК, особливо після 30 діб. Однак зразки, збережені при наднизьких температурах (-196°C), майже повністю зберігають свою цілісність. Модифікований буфер з 5% гліцерином та іншими стабілізуючими агентами для виконання змивів виявився більш ефективним, ніж деіонізована вода, знижуючи деградацію ДНК навіть при кімнатній температурі. Отримані результати підкреслюють важливість оптимізації технік збереження ДНК, особливо в судовій та медичній практиці, для забезпечення надійності та точності генетичного аналізу протягом часу.
Теги:
Список цитованої літератури:
- GE Healthcare Life Sciences. Your forensic samples, our experience. Buckinghamshire: GE Healthcare Life Sciences; 2010. 28 р. Available from: https://www.dulis.nl/technical-sheets/W/WB/WB1/WB100032/WB100032_ BR.pdf.
- Chum PY, Haimes JD, Andre CP, Kuusisto PK, Kelley ML. Genotyping of Plant and Animal Samples without Prior DNA Purification. J. Vis. Exp. 2012;(67):e3844. DOI: https://doi.org/10.3791/3844.
- Gray MA, Pratte ZA, Kellogg CA. Comparison of DNA preservation methods for environmental bacterial community samples, FEMS Microbiology Ecology. 2023;83(2):468-477. DOI: https://doi.org/10.1111/1574-6941. 12008.
- Kline MC, Redman J, Duewer DL, Parker B, Peter J, Butler J. Recovery of DNA from Aged Bloodstains. Maryland: SAIC-Frederick Inc; 2005. 680 p.
- Faleeva T, Ivanov I, Mishin E, Vnukova N, Kornienko I. The problem of molecular-genetic identification of sweat and grease deposits in the human fingerprints. Sudebno-meditsinskaya ekspertiza. 2016;59(14):14-18. DOI: https://doi.org/10.17116/sudmed201659214-18.
- Sillen LG, Martell АЕ. Stability Constants of Metallon Complexes. London: The Chemical Society; 1964. 545 p.
- Lee SB, Crouse CA, Kline MC. Optimizing Storage and Handling of DNA Extracts. Forensic Science Review. 2010;22(2):131-144.
Публікація статті:
«Вісник проблем біології і медицини», 2024 Випуск 4, 175, 510-517 сторінки, код УДК 577.15:343.9
